5개의 레이저를 갖춘 NovoCyte Penteon 유세포분석기 시스템
작성자 관리자
날짜 2021-03-31 13:25:05
조회수 1220
초고성능 차세대 자동 유세포분석기
브랜드 Agilent
제품명 NovoCyte Penteon
상세정보
NovoCyte Penteon은 차세대 NovoCyte 유세포 분석기 입니다. Penteon은 Blue, Red, Violet, Yellow-Green, UV의 5개의 레이저를 갖춘 유세포 분석기로, 가장 까다로운 시료 패널 요건을 충족시키기 위해 최대 30개의 형광color를 분석할 수 있는 시스템 입니다.
최고의 광검출기
실리콘 광전자 증배관(SiPM)은 고체상, 실리콘 기판 기반의 광자 수준의 감도 반도체 장치로, 7.2 로그의 측정 범위를 제공합니다. 동시에 작동하는 콤팩트한 애벌랜치 광 다이오드 어레이로 구성된 SiPM은 광카운팅 기능이 있는 소형 검출기입니다. NovoCyte Penteon에 설계된 혁신적인 광학 장치는 30개의 독립적인 SiPM을 통합하여 각 형광 채널에서 신호를 획득하고 처리합니다.
작은 입자를 검출하는 우수한 산란 분해능
NovoCyte Penteon 산란 검출 광학 장치 및 신호 처리 장치는 입자 크기를 0.1μm까지 분석하도록 최적화되었습니다. 이러한 우수한 분해능으로 혈소판, 박테리아 및 다양한 초미세 입자를 쉽게 식별하고 분석할 수 있습니다.
높은 재현성과 안정성
NovoCyte Penteon 및 NovoCyte Quanteon의 유체 시스템은 뛰어난 성능을 제공하도록 설계되었습니다. 다른 유세포 분석기와 비교할 때 NovoCyte Penteon 및 NovoCyte Quanteon의 유체 일관성 및 안정성은 타의 추종을 불허합니다. 연동 펌프를 사용하는 다른 기기는 종종 유체 맥동의 영향을 받아 절대 세포 수에서 불일치와 부정확성을 초래합니다.
유속에 영향 받지 않는 일관된 결과
NovoCyte Penteon의 유체 피드백 제어 메커니즘은 안정적인 유속을 지속적으로 유지합니다. 다양한 범위의 시료 유속에서 뛰어난 안정성을 유지하는 것은 물론 다양한 운용 조건에서도 일관된 결과를 제공합니다. 여기에서 볼 수 있듯이, 다양한 유속에서 CV가 시중의 다른 시스템에 비해 크게 향상되었습니다.
응용 분야
세포 사멸 분석
세포 사멸 또는 세포예정사(programmed cell death)는 세포가 죽는 방식을 조절하는 과정으로 세포를 수축, 응축하게 하는 특정 경로를 활성화하여 결과적으로 식세포작용에 의해 제거됩니다. 이는 통제할 수 없이 죽어서 분열되어 면역 반응을 활성화시키는 유해한 영향을 초래하는 괴사 세포 죽음과 뚜렷한 차이를 보여줍니다. 따라서 사멸 세포는 매우 질서있는 방식으로 죽어서 부근의 세포와 조직 파괴를 막아 줍니다.
T세포 죽음을 측정하고 세포 사멸 또는 괴사를 구별하는 다양한 방법이 있습니다. 자동 보정 설정 및 광범위한 형광 검출 측정 범위를 가진 NovoCyte 유세포 분석기를 사용하면 PMT 전압 조절이 필요 없이 이러한 분석에 대한 간편한 정량이 가능합니다.
면역표현형 검사
면역 상태는 질병 상태, 치료 효율성 및 백신과 같은 외부 자극에 대한 반응과 관련이 있습니다. 면역 표현형 분석으로 후보 세포 유형, 하위 등급 및 기능을 신속하게 식별할 수 있습니다. 면역 세포는 백신의 면역원성과 그 효율성에 영향을 미칠 수 있으므로 다양한 면역 세포 집단의 빈도와 단핵구, NK 세포, T와 B 세포 같은 특정 세포 하위 집합의 분화 및 활성화 상태를 모니터링하는 것이 필수적입니다. NovoCyte 유세포 분석기는 여러 백혈구를 동시에 정량할 수 있어 환자의 면역 상태를 보다 잘 이해하고 전염성 질환에 대한 면역 반응을 감시할 수 있습니다.
세포 증식
세포 증식은 필수 기능이며 조절되지 않을 경우 질병을 유발할 수 있는 고도로 구조화된 이벤트입니다. 절대 세포 수 또는 CFSE와 같은 염료로 증식을 측정할 수 있습니다. CFSE로 라벨링된 세포가 분할될 때, 염료는 딸세포 사이에서 균등하게 분할되고 염료가 지속적으로 희석됨에 따라 시간에 따른 CFSE 형광 손실을 측정할 수 있습니다. 또한, 염료의 평균 형광 강도(MFI)를 시간에 따른 세포 농도로 플롯하여 둘 사이의 반비례 관계를 나타냅니다. 이러한 유형의 분석은 종종 T 림프구 활성화의 변화를 관찰하는 데 사용됩니다.
그림: CFSE를 사용한 Jurkat T 세포의 증식 측정. A) Jurkat T 세포를 CFSE로 라벨링하고 NovoCyte 유세포 분석기에서 시간 경과에 따른 세포 분열을 측정하여 분석합니다. 각 피크는 개별 시점을 나타냅니다. B) 세포가 분열할 때 생성된 신호의 희석을 사용하여 시간 경과에 따른 CFSE의 평균 형광 강도(MFI)를 측정하는 한편, 절대 세포 수를 나타냅니다.
사이토카인 검출
사이토카인은 병원체, 자가면역 또는 치료제에 의한 활성화에 대한 면역세포 반응에 필수적인 저분자입니다. 사이토카인에 의한 신호 전달은 유전자 조절, 선천성 면역과 적응성 면역 반응, 그리고 염증을 조절할 수 있습니다. 따라서 사이토카인 생성을 측정하고 사이토카인 생성의 근원을 확인하는 것은 면역 반응에 대한 심층적인 이해에 중요합니다. 사이토카인의 비드 기반 유세포 분석 기반 검출은 형광 강도가 다양한 비드 집단의 혼합물을 사용하여 단일 시료에서 여러 용해성 분석물을 측정하는 데 매우 효과적인 방법입니다.
세포 내 단백질 검출
세포내 단백질의 검출 및 분석을 통해 세포 하위 집단 및 세포 과정에 대한 추가적인 특성 규명이 가능합니다. 세포 표면에 있지 않은 단백질을 분석하려면 세포 고정 및 투과화를 거쳐야 합니다. 그러나 많은 인산화 특이적인 항체는 세포내 염색에 사용되는 일반적인 세척액 기반 투과화 방법과 호환되지 않습니다. 인산화 특이적인 항체에 대한 적절한 고정 및 투과화 방법을 결정할 때 특별한 주의가 필요합니다. 가장 일반적인 방법은 고정 시 1.5% 파라포름알데히드를 사용한 다음 투과화를 위해 100% 메탄올을 사용합니다. 이 방법은 많은 항체에 적용할 수 있지만 모든 인산화 특이적인 항체에 적용할 수 있는 것은 아닙니다.
또한, 비동질성 시료에서 다양한 세포 집단을 식별하려면 표면의 단백질과 결합된 인산화 단백질을 염색해야 합니다. 이러한 에피토프의 고정제에 대한 민감성을 특별히 주의를 기울여야 하며, 에피토프를 손상시키지 않도록 예방조치를 취해야 합니다. 따라서 고정 전에 특정 표면 마커에 대해 시료를 미리 염색해야 할 수 있습니다.
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세포 주기 분석
정상적인 인간 체세포는 일정한 양의 DNA를 포함하는 이배체입니다. 세포 주기가 진행되는 동안 DNA 합성으로 전체 DNA 함량이 두 배로 늘어나고 유사 분열 후 정상적인 DNA 함량을 회복합니다. NovoCyte 유세포 분석기를 사용하면 상세한 세포 주기 분석을 수행하여 종양 세포 분화, 세포 변형 및 세포 화합물 간의 상호 작용을 이해할 수 있습니다.
그림: 10µg/M MG132 또는 500µg/M 5-FI로 16시간 처리한 후, ACEA NovoCyte 유세포 분석기로 A549 세포의 세포 주기 분포를 분석했습니다. NovoExpress에 포함된 세포 주기 분석 모듈을 사용하면 플롯에 G0/G1 단계(녹색), S 단계(노란색) 및 G2/M 단계(파란색)의 세포가 표시됩니다. 일반 미처리 세포와 비교하여 MG132 처리 세포는 G2/M 단계에서 정지된 반면 5-FU 처리 세포는 G0/G1 단계에서 정지되었습니다.
자동샘플러 NovoSampler Q의 추가장착과 유세포분석의 로봇 자동화
NovoSampler Q의 추가장착을 통해 다양한 시료 용기에 분석시료를 로딩하여 유세포분석을 위한 장시간의 소요되는 시간에서 해방되실 수 있습니다.
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